紫外可見分光光度計UV-VIS是一種基于物質(zhì)對紫外光或可見光區(qū)域的吸收特性，進行定性、定量分析的儀器。它通過測量樣品對特定波長光的吸收程度，來確定樣品中物質(zhì)的濃度或結(jié)構(gòu)信息，廣泛應(yīng)用于化學、生物、醫(yī)藥、環(huán)境等領(lǐng)域。其工作原理主要依賴于物質(zhì)對光的吸收特性。不同的物質(zhì)因其分子、原子和分子空間結(jié)構(gòu)的不同，其吸收光能量的情況也會有所差異。因此，每種物質(zhì)都有其有的、固定的吸收光譜曲線。通過測量物質(zhì)在特定波長下的吸光度，我們可以了解物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間的相互作用。

　　紫外可見分光光度計UV-VIS的操作要領(lǐng)如下：

　　一、儀器準備

　　開機預(yù)熱

　　接通電源，打開儀器開關(guān)，讓儀器預(yù)熱一段時間，一般需要15-30分鐘。這樣做是為了讓儀器內(nèi)部的光學元件、電子元件等達到穩(wěn)定的工作狀態(tài)，確保測量的準確性和穩(wěn)定性。例如，在一些高精度的測量中，未預(yù)熱充分的儀器可能會出現(xiàn)波長校準偏差等問題。

　　波長校準（如有需要）

　　使用已知光譜特性的標準物質(zhì)（如鈥濾光片）來檢查和校準波長。不同型號的儀器可能有不同的校準方法，但一般來說，需要將標準物質(zhì)放入光路中，在儀器的軟件或控制面板上找到波長校準選項，按照提示操作，使儀器顯示的波長與標準物質(zhì)的吸收峰波長相符。這一步驟對于保證測量波長的準確性至關(guān)重要，因為波長的微小偏差可能會導致測量結(jié)果的較大誤差。

　　二、樣品準備

　　選擇合適的吸收池

　　根據(jù)測量的波長范圍選擇玻璃或石英吸收池。一般來說，紫外光區(qū)（通常小于400nm）應(yīng)使用石英吸收池，因為普通玻璃會吸收紫外光；可見光區(qū)可以使用玻璃吸收池。同時，要確保吸收池干凈、無劃痕，因為吸收池的透明度和均勻性會影響測量結(jié)果。

　　樣品溶液制備

　　將待測樣品溶解在合適的溶劑中，制備成適宜濃度的溶液。溶液濃度應(yīng)在儀器的線性范圍內(nèi)，即吸光度值在0.2-0.8之間比較合適。如果濃度過高，可能會導致吸光度超出線性范圍，使測量結(jié)果不準確；濃度過低，則可能會使測量信號較弱，增加測量誤差。同時，要注意溶劑的選擇，溶劑在測量波長范圍內(nèi)應(yīng)該沒有明顯的吸收，否則會干擾樣品的測量。

　　三、測量操作

　　設(shè)置測量參數(shù)

　　根據(jù)樣品的性質(zhì)和測量要求，在儀器上設(shè)置測量模式（如吸光度模式、透過率模式等）、波長范圍、掃描速度等參數(shù)。例如，如果是進行定量分析，通常采用吸光度模式；如果是研究樣品的光譜特性，可能需要設(shè)置較寬的波長范圍和適當?shù)膾呙杷俣取?/div>